BSP(Bisulfite Genomic Sequence)技術是提取的基因組DNA,經過NaHSO3處理后,未甲基化CpG中“C”會轉換成“T”;而甲基化CpG中的“C”依然保持“C”,通過設計BSP引物,進行PCR擴增,測序,從而確定CpG中甲基化數目及位置。目前主要用于啟動子中CpG甲基化程度高低與基因表達之間的關系研究。
基本流程:
技術優勢:
(1)?????? 本公司在未知基因啟動子克隆方面,具有豐富的經驗。目前已完成了團頭魴、蜥蜴、菊花、香草、中國對蝦、三疣梭子蟹等眾多的物種基因啟動子調取工作,為分析CpG島以及CpG甲基化與表達調控研究打下基礎。
(2)?????? 目前,國內外試劑盒C-T轉換試劑盒的效率與實際宣傳有一定差距,本公司對試劑盒進行了系統改進,使得C-T轉換效率達到99%以上。
(3)?????? BSP-PCR中最難的是引物的設計及優化,本公司經過多年的積累,在引物的設計方面具有極為豐富的經驗。
客戶須知:
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CpG甲基化BSP-PCR技術服務 |
周期 |
最終提供客戶資料 |
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CpG甲基化BSP-PCR技術服務 |
14-21個工作日,視樣品和基因數目而定。 |
詳細實驗總結報告(包括基因組DNA提取、C-T轉換、PCR擴增、電泳、測序、BiQAnalyzer分析結果等)。 ? |
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案例:
本實驗,首先通過啟動子克隆技術分別獲取甘肅鼢鼠和高原鼢鼠某基因上游的啟動子,通過http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi在線尋找該啟動子的CpG區域,然后通過對BSP-PCR技術對不同海拔該基因啟動子甲基化程度進行分析,從中找到膚色變化與該基因啟動子甲基化程度的關系,部分實驗結果如下:
客戶提供:
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樣品類型 |
組織樣本 |
細胞樣品 |
基因組DNA |
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樣品需要量 |
≥100 -200 mg |
≥5-10×106個 |
≥2.0 ug |
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取樣和保存環境 |
新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中 |
新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中 ? |
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運輸 |
杭州市內干冰上門取樣; 外地客戶干冰快遞運輸。 |
杭州市內干冰上門取樣; 外地客戶干冰快遞運輸。 ? |
杭州市內干冰上門取樣; 外地客戶干冰快遞運輸。 ? |
*(經本公司評估后,實驗沒有結果,不收取任何費用)
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